表达系统是分子生物学中用于外源基因表达的技术体系,通过该体系可在宿主生物中实现目标蛋白的合成。其核心组成部分及特点如下:
一、主要构成
宿主 执行蛋白合成的生物体,包括细菌、酵母、植物细胞、动物细胞等,不同宿主适合表达不同类型的蛋白。
外源基因
需要表达的目标蛋白的基因序列,需通过载体导入宿主细胞。
载体
用于携带外源基因进入宿主细胞的工具,需与宿主基因组兼容(如质粒、病毒载体等)。
辅助成分
包括启动子、终止子、标签基因(如 GFP)、抗生素抗性基因等,用于调控基因表达和筛选细胞。
二、核心功能
通过上述组件协同作用,实现外源基因在宿主中的转录和翻译,最终合成目标蛋白。例如,在细菌中表达胰岛素时,需将胰岛素基因导入大肠杆菌,通过抗生素抗性筛选获得转染细胞,再通过诱导表达系统(如诱导物添加)启动蛋白合成。
三、应用领域
基础研究: 基因功能验证、蛋白质结构预测; 工业生产
疫苗开发:异体抗原性表达系统用于疫苗原蛋白的制备。
四、表达系统类型
瞬时表达系统
- 载体DNA未整合到基因组,表达后随细胞分裂消失,适合短期蛋白合成或基因功能研究;
- 例如:基因敲除、RNA干扰实验。
稳定表达系统
- 外源基因整合到宿主基因组,可长期稳定表达,适合大规模生产;
- 例如:哺乳动物细胞系(如HEK293)、植物表达系统。
五、关键意义
蛋白表达系统是基因工程技术的核心,广泛应用于医药、农业、工业等领域,通过精准调控实现蛋白质的定制化生产。